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【摘要】目的優(yōu)選獨一味水煎煮提取工藝。方法采用正交試驗法，采用出膏率和總黃酮含量為指標，優(yōu)選工藝條件。結(jié)果獨一味水煎煮提取工藝的最佳參數(shù)為：加水煎煮3次，每次1h，第1次加水量為11倍，第2、3次加水量為8倍量。結(jié)論優(yōu)選的獨一味提取工藝能較好地保證制劑的質(zhì)量。

【關(guān)鍵詞】獨一味；總黃酮；出膏率；正交試驗；綜合評分

【Abstract】ObjectiveTofindouttheoptimumparametersusedboilingwaterextractionfromtheHerbaLamiophlomis.MethodsUsedtheorthogonaldesignmethod,investigatedtheeffectsoftheratioofextractionandthecontentoftotalflavones.ResultsTheoptimumconditionwasobtained:addedelevenfoldsofwaterforfirsttime,andedeightfoldsofwaterforothertwicetimes,onehoursindurationforeachtime.ConclusionTheextractionprocessshowsstabilizationandfeasibility,canbeavailableforindustrialproductionatlargescale.

【Keywords】Herbalamiophlomis；Ratioofextraction；Contentoftotalflavones；Orthogonaldesign；Compositescoremethod

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獨一味為藏族習(xí)用藥材，為唇形科植物獨一味Lamiophlomisrotata（Benth．）Kudo的干燥全草，具有活血止血，祛風(fēng)止痛，干黃水的功能，用于治療跌打損傷，外傷出血，風(fēng)濕痹痛，黃水病[1]。獨一味在藏藥應(yīng)用歷史悠久，《月王藥診》、《四部醫(yī)典》、《晶珠本草》等藏醫(yī)典籍均有記載[2]。

獨一昧膠囊為《中國藥典》2000年版[3]及2005年版[4]收載品種，為獨一味經(jīng)水煎煮加工制成，在臨床用于治療婦科和神經(jīng)外科疾病所致的疼痛[5]、治療三叉神經(jīng)痛[6]等疼痛性疾病有較明顯的止痛效果，而且同時具有止血、抑菌、提高特異性和非特異性免疫、明顯提高人體痛閾等作用，尤其在治療腫瘤性疼痛時可作為第一階梯使用的輔助用藥，無明顯毒副作用及藥物成癮性[7-8]。

總黃酮是獨一味膠囊的有效部位之一，化學(xué)研究表明獨一味中黃酮類成分主要是芹菜素、木犀草素、槲皮素及其苷類[9]，《中國藥典》2000年版[3]及2005年版[4]該品種項下收載了水煎煮提取的制法和總黃酮的含量測定方法。獨一味片采用單因素考察法以總黃酮含量作為不同提取工藝研究的質(zhì)量檢測方法[10]，考察因素和指標不夠全面，為提高獨一味制劑的質(zhì)量，降低生產(chǎn)成本和優(yōu)化提取工藝。

林天慕等[11]比較溶劑萃取法及大孔吸附樹脂梯度洗脫分離法兩種方法制備樣品，通過小鼠醋酸扭體法及熱板法篩選鎮(zhèn)痛有效部位，認為獨一味鎮(zhèn)痛作用的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)與黃酮及其苷類有一定關(guān)系，本文以出膏率和總黃酮含量為考察指標，采用正交試驗法研究獨一味水煎煮提取工藝。

1材料與儀器

獨一味藥材由成都安多貿(mào)易有限公司提供，經(jīng)成都中醫(yī)藥大學(xué)民族醫(yī)藥研究所鑒定，為唇形科植物獨一味Lamiophlomisrotata(Benth．)Kudo的干燥全草，按《中國藥典》2005年版獨一味膠囊項下制法規(guī)定進行粉碎，粉碎成粗粉。

儀器：Spectrumlab22PC（上海棱光技術(shù)有限公司，編號：20010143）；BP121S電子天平（德國Sartorius公司）

試劑：乙醇、亞硝酸鈉、硝酸鋁、氫氧化鈉等試劑均為分析純

對照品：蘆?。ㄖ袊幤飞镏破窓z定所提供，含量測定用，0080-9705）

2方法與結(jié)果

2．1藥材吸水率的測定取獨一味粗粉150g，加8倍量水浸泡過夜，濾過，測得吸水率為326．9%，即應(yīng)考慮增加吸水量3倍。

2．2正交試驗設(shè)計采用正交設(shè)計表（L34）安排試驗，因素水平表見表1，各試驗號使用獨一味粗粉均為150g，進行回流煎煮提取，第1次提取增加吸液量3倍，用200目濾布濾過，合并濾液，作為正交試驗中所得的提取液。

2．3總黃酮含量測定[4]對照品溶液的制備：精密稱取經(jīng)120℃減壓干燥至恒重的蘆丁對照品適量，加70%乙醇制成濃度為0．64mg/ml的對照品溶液。

標準曲線的制備：精密量取上述標準溶液1．0、1．5、2．0、2．5、3．0ml至25ml量瓶中，加水至6ml，加入5%亞硝酸鈉溶液1ml，搖勻，放置6min，加10%硝酸鋁溶液1ml，搖勻，放置6min，加氫氧化鈉試液10ml，再加水至刻度，搖勻，放置15min；以相應(yīng)的溶液為空白，照紫外-可見分光光度法（2005版藥典一部附錄VA），在500nm的波長處測定吸光度，以吸光度（A）為縱坐標，濃度（C）為橫坐標，繪制標準曲線。測定法：精密稱取正交試驗中所得的提取液1ml于25ml量瓶中，照標準曲線的制備項下的方法，自“加水至6ml”起依法測定吸收度，從標準曲線上讀出供試品溶液中蘆丁的重量，計算，即得。

2．4出膏率測定將正交試驗中所得的提取液，減壓濃縮至500ml，精密吸取50ml，分別置干燥至恒重的蒸發(fā)皿中，水浴蒸干，80℃以下減壓干燥8h，稱定重量，計算出膏率。

2．5正交試驗結(jié)果及結(jié)果分析正交試驗結(jié)果見表2。

出膏率評分＝（出膏率／出膏率最大值)×0．3×100；總黃酮含量評分＝（總黃酮含量/總黃酮含量最大值）×0．7×100；綜合評分＝出膏率評分＋總黃酮含量評分。

采用SPSS軟件對綜合評分結(jié)果進行多元逐步回歸分析，得到回歸方程：

Y=42．608+14．970×C

相關(guān)系數(shù)R=0．817；顯著水平p=0．007

回歸方程有顯著性意義。

通過SPSS軟件對綜合評分結(jié)果進行多元回歸分析，得到各因素對綜合評分影響的顯著水平順序為：C（P=0．010）>A（P=0．084）>D（P=0．388）>B（P=0．533）

以上結(jié)果表明對綜合評分影響最大的因素為提取次數(shù)（C），其次為加水量（A）。

綜合考慮降低生產(chǎn)成本和優(yōu)化提取工藝，結(jié)合獨一味膠囊項下制法規(guī)定，確定獨一味的提取工藝參數(shù)為：取獨一味，加水煎煮3次，每次1h，第1次加水量為11倍，第2、3次加水量為8倍量，合并煎液，濾過。

2．6驗證試驗稱取獨一味粗粉3份，每份150g，確定的提取工藝進行工藝驗證試驗，結(jié)果見表3。

結(jié)果表明：驗證試驗結(jié)果表明獨一味的水煎工藝基本穩(wěn)定、可行。

3討論

試驗研究結(jié)果表明獨一味膠囊制法有一定合理性。通過試驗研究，采用綜合評分的方法，避免單純采用出膏率或單純采用總黃酮帶來的工藝偏差，為獨一味膠囊工藝改進及其相關(guān)產(chǎn)品的開發(fā)提供了試驗研究基礎(chǔ)，能較好地保證獨一味制劑的質(zhì)量。

參考文獻

［1］國家藥典委員會.中華人民共和國藥典一部.化學(xué)工業(yè)出版社,2005:184.

［2］《中華本草》編委會.中華本草.上海：上?？茖W(xué)技術(shù)出版社,2007：555.

［3］國家藥典委員會.中華人民共和國藥典一部.北京：化學(xué)工業(yè)出版社,2000:533.

［4］國家藥典委員會.中華人民共和國藥典一部.北京：化學(xué)工業(yè)出版社,2005:541.

［5］尹永舉，張玉榮，張紅瑾，等.獨一味膠囊鎮(zhèn)痛療效觀察.中國鄉(xiāng)村醫(yī)藥雜志,2004，11（11）：50.

［6］童永碧.獨一味膠囊治療三叉神經(jīng)痛的臨床觀察.貴陽中醫(yī)學(xué)院學(xué)報,2002，24（2）：12.

［7］秦萬龍.獨-味膠囊治療癌性疼痛128例.中國中醫(yī)藥信息雜志,2001，8（10）：65.

［8］李洪亮，都民安，王寶太，等.藏藥獨一味對癌痛的鎮(zhèn)痛作用.河北醫(yī)藥,2002，24（2）：146.

［9］劉長余，姚雪芳.獨一味的化學(xué)成分與臨床應(yīng)用研究概況.海峽藥學(xué),2005，17（1）：82.

［10］趙文昌，蘇光華.獨一味片提取工藝研究.河南中醫(yī)藥學(xué)刊,1996，11（2）：8.